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提取和分離果品中的甲基硫菌靈和多菌靈待測液, 用紫外分光光度計在 282nm處測定吸光度 , 與同樣方法測定并繪制的標準曲線比較, 即可得到甲基硫菌靈和多菌靈的含量。 

甲基硫菌靈 (又名甲基托布津 )是一種廣 譜內吸型殺菌劑, 被廣泛用于防治果品的輪紋 病和黑腐病及貯藏期的青霉病和綠霉病等 。但 因生產商和銷售環節中的違規操作, 使果品中 甲基硫菌靈的含量超過國家標準 (GB14870 - 94)規定 ,高殘留*每千克不超過 0.5mg。 為防止高殘留農藥的果品及加工品上市, 國家 要求在銷售前按國標 SN0162 -92 用氣相色 譜 —質譜儀法, 測定甲基硫菌靈的含量 。但儀 器昂貴 ,操作技術復雜 。為此筆者介紹一種簡 便易行 、準確可靠 、一般實驗室即可測試的紫外 分光光度計測定法。 1 標準儲備液和使用液的配制 稱取 50mg甲基硫菌靈可濕性粉劑 , 放入燒杯中, 用三氯甲烷溶解, 定容至 50ml。 從中準確吸取 10.00ml甲基硫菌靈的標準液 , 移入 100ml容量瓶中,用三氯甲烷稀釋至刻度 , 制成甲基硫菌靈標準使用液。 同樣稱取 50mg多菌靈放入 50ml容 量瓶中 , 用 1mol/L鹽酸溶液溶解并定容至刻 度 。再準確吸取 10.00ml多菌靈標準儲備液 , 移入 100ml容器瓶中, 用 1mol/L鹽酸溶液定容 至刻度 ,制成多菌靈標準使用液 。

2 待測樣品的提取和分離 隨機抽取果實樣品 ,用清水洗去泥沙,晾干 或用吸水紙吸干果實表面的水。將果實縱切分 成兩等份 ,取果肉部分, 置于干燥的組織搗碎機 或研缽內破碎磨細。 稱取 50g果泥樣品, 加 50ml甲醇, 用高速離心機 (每分鐘 6000轉 )離 心分離 10分鐘 ,移上清液于燒杯中 。沉淀物用 20ml甲醇攪勻后, 加水 10ml, 作用 10 分鐘, 再 次高速離心 10 分鐘。上清液并入盛濾液的燒 杯中 ,在 80℃水浴上用熱空氣流吹去部分甲 醇, 倒入分液漏斗中, 加 10%的氯化鈉溶液 30ml和 25ml石油醚 ,混合搖動 2分鐘后 ,再加 25ml石油醚振搖 2分鐘以充分提取待測物藥 液。除去石油醚,加鹽酸提高酸度至 pH值 1 ～ 2,用二氯甲烷提取兩次 (每次加 25ml, 作用 2 分鐘 )。合并兩次的提取液, 用 25ml蒸餾水洗 滌 1次,用尖嘴吸管吸出二氯甲烷層,移入干燥 的分液漏斗中, 供甲基硫菌靈含量測定之用。 水洗液合并入水層 ,留作多菌靈測定用 。

3 測定殘毒

3.1 繪制標準曲線 準確吸取 0.0、0.1、0.3、0.5ml甲基硫菌靈 標準使用液 (相當于 0、10、30、50μg甲基硫菌靈 ), 分別置于 30ml圓底離心器中 , 離心揮干 溶劑后 ,各加入 10ml乙酸 -乙酸銅溶液及 2 ～ 5粒玻璃珠,接上空氣冷凝器, 于酒精燈或微型 電爐上緩緩加熱煮沸 30 分鐘取下 , 用 20ml濃 度為 1mol/L的鹽酸洗滌冷凝管和圓底離心管 , 作用 2分鐘 。將液體移入 125ml分液漏斗中 。 用二氯甲烷提取 2次 , 每次用量 10ml。用尖嘴 吸管吸出二氯甲烷層移入備用的干燥分液漏斗 中 。上述酸溶液用 2mol/L的*中和,調 整 pH值至 6.0 ～ 6.5(堿液用量為 25ml), 中和 液用二氯甲烷提取 2次 , 每次 20ml, 把兩次的 提取液合并在一起,再用 10ml蒸餾水洗滌分液 漏斗, 靜置分層后 ,將二氯甲烷層并入另一存有 二氯甲烷層的分液漏斗中。準確加入 10ml濃 度為 1mol/L鹽酸 ,再次提取 5分鐘, 靜置 10分 鐘左右 。待分層后, 將酸提取液倒入 1cm石英 雙色杯中,用 1mol/L的鹽酸調節分光光度計的 零點, 在波長 282nm處分別測 0 ～ 50μg甲基硫 菌靈標準液的吸光度 (A282)。以 A282值為縱 坐標, 甲基硫菌靈的含量為橫坐標,繪制甲基硫 菌靈的標準曲線 。 準確吸取 0.0、0.1、0.3、0.5ml多菌靈標準 使用液 (相當于 0、10、30、50μg多菌靈 ), 放入 分液漏斗中 ,各加入 20ml濃度為 1mol/L的鹽 酸 ,用二氯甲烷提取 2 次, 每次用 10ml。用尖 嘴吸管吸出二氯甲烷層 ,移入干燥的分液漏斗 中 。酸液用 2mol/L的*溶液中和至 pH 值 6.0 ～ 6.5,用二氯甲烷提取 2次, 每次 20ml, 提取液用 10ml蒸餾水洗滌 1次。靜置分層后 , 將兩次的二氯甲烷層合并 ,準確加入 10ml濃度 為 1mol/L的鹽酸 , 再次酸提 5分鐘 。靜置 10 分鐘。待分層后 ,將酸提液倒入 1cm石英雙色 杯中, 用 1mol/L的鹽酸調節分光光度計的零 點 。在波長 282nm處分別測 0 ～ 50μg多菌靈 標準液的吸光度值(A282)。以 A282值為縱坐 標 ,多菌靈的含量為橫坐標 ,繪制多菌靈的標準 曲線。

3.2 測定果品中的甲基硫菌靈和多菌靈含量 取果肉的二氯甲烷提取液 , 自然揮干或加 熱揮干后,用 10ml乙酸 -乙酸銅溶液分次溶解殘渣 ,并移入 30ml圓底離心器中, 加 2 ～ 5粒玻 璃珠 ,接上空氣冷凝管, 用酒精燈或微型電爐緩 緩煮沸 30分鐘取下 ,用 20ml濃度為 1mol/L的 鹽酸從冷凝管頂端洗滌冷凝管和圓底離心管, 作用 2分鐘。將液體移入 125ml分液漏斗中, 用二氯甲烷提取 2次, 每次用量 10ml。用尖嘴 吸管吸出二氯甲烷層移入備用的干燥分液漏斗 中。上述酸溶液用 2mol/L的*中和 ,調 整 pH值 6.0 ～ 6.5(堿液用量為 25ml)。中和 液用二氯甲烷提取 2 次, 每次 20ml, 把兩次的 提取液合并在一起 ,再用 10ml蒸餾水洗滌分液 漏斗 ,靜置分層后, 將二氯甲烷層并入另一種存 有二氯甲烷層的分液漏斗中 ,準確加入 10ml濃 度為 1mol/L的鹽酸, 再次提取 5分鐘, 靜置 10 分鐘左右 。待分層后 ,將酸提取液倒入 1cm石 英雙色杯中,用 1mol/L的鹽酸調節分光光度計 零點 。在波長 282nm處測樣品的吸光度。與 甲基硫菌靈的標準曲線比較 ,計算樣品中甲基 硫菌靈的含量 。 取“待測樣品的提取和分離 ”中的多菌靈 測定液, 用 2mol/L氫氧化銨溶液中和至 pH值 6.0 ～ 6.5,用二氯甲烷提取 2次 ,每次 20ml, 提 取液用 10ml蒸餾水洗滌 1 次, 靜置分層后, 將 兩次的二氯甲烷層合并 ,準確加入 10ml濃度為 1mol/L鹽酸 ,再次酸提 5分鐘 。靜置 10分鐘, 待分層后 , 將酸提液倒入 1cm石英雙色杯中, 用 1mol/L的鹽酸調節分光光度計零點。在波 長 282nm處測定樣品的吸光度。與多菌靈的 標準曲線比較 ,計算樣品中多菌靈的含量。 測定結果按下式計算: X= V1 ×C m×V2 ×100 式中 V1為加入提取溶劑的總毫升數 ;m為樣 品重量(g);V2為測定時使用提取溶劑的毫升 數;C為相當于標準濃度 (mg);X為樣品中甲 基硫菌靈的含量(mg/kg)。 (注意:用石油醚和二氯甲烷萃取的整個過程, 不論加入量還是取出量 ,必須準確 、快速。當甲 基硫菌靈殘留量過高時, 可減少樣品的用量或 增加稀釋倍數 。)